人工授精通常在药物催产后 25 一 40小时，经过挤压雌蟾蜍腹部能排出卵子时进行。
1、制备精液悬浊液
① 将雄蟾蜍麻醉，用剪子和镊子剖开其腹部，取出精巢。
② 将精巢悄悄地在滤纸上翻滚除去粘在上面的血液和别的结缔组织。
③ 在经消毒处理的研钵火培养皿中把精巢剪碎，每对精巢加人10-15 毫升生理盐水或10%的林格氏液稀释，静置10分钟，即制成精液恳浊液。
2、挤卵授精
（1）挤卵办法
捉住雌蟾蜍，使其背部对着右手手心，手指有些刚好在其前肢后边圈助蟾蜍体。另一人捉住后肢，使其扩展，然后用左手从蟾蜍体前有些轻加压力，并逐步向泄殖腔方向移动，使卵从泄殖孔排出。
( 2 ）授精
将雌蟾蜍的卵子挤入感制造好的精液悬浊液的器皿中，边挤卵边摇摆器皿．或用茸毛等柔软物品悄悄拌和，促进精子与卵子充沛接触，进步受精时机。水温在 20 ℃ 一 30 ℃ 时，受精率最高。水温低于 18 ℃ 或高于 32 ℃ ，受精率都会下降。
