人工催产的雌蟾蜍可让其与雄蟾蜍抱对后产卵受精，也可以通过人工授精的方法，使成熟的卵子和精子结合，完成受精过程。
人工授精一般在药物催产后25一40小时，通过挤压雌蟾蜍腹部能排出卵子时进行。
1．制备精液悬浊液
①将雄蟾蜍杀死或麻醉，用剪子和镊子剖开其腹部，取出精巢。
②将精巢轻轻地在滤纸上滚动除掉粘在上面的血液和其他结缔组织。
③在经消毒处理的研钵火培养皿中把精巢剪碎，每对精巢加人10-15毫升生理盐水或10%的林格氏液稀释，静置10分钟，即制成精液恳浊液。
2．挤卵授精
（1）挤卵方法抓住雌蟾蜍，使其背部对着右手手心，手指部分刚好在其前肢后面圈助蟾蜍体。另一人抓住后肢，使其伸展，然后用左手从蟾蜍体前部分轻加压力，并逐渐向泄殖腔方向移动，使卵从泄殖孔排出。
（2）授精将雌蟾蜍的卵子挤入感配制好的精液悬浊液的器皿中，边挤卵边摇动器皿．或用羽毛等柔软物品轻轻搅拌，促使精子与卵子充分接触，提高受精机会。水温在20℃一30℃时，受精率最高。水温低于18℃或高于32℃，受精率都会降低。
