想要培育文心兰组培苗？快来学习这项技术规程
罗远华等
文心兰( oncidiumhybridum )又名金蝶兰、舞女兰或瘤瓣兰等,是指兰科文心兰属植物,主要分布于美国、墨西哥、巴拉圭、秘鲁、巴西、牙买加、阿根廷等中南美洲的热带和亚热带地区 .文心兰植株轻巧、花色丰富、花姿优美、部分品种具香味,适应性广、花期长、观赏与经济价值高,在切花、盆花及景观等方面应用广泛,与蝴蝶兰、石斛、大花蕙兰并列为四大洋兰,是世界重要的商品花卉.
近年来,文心兰在福建、广东、海南、云南、贵州等地得到快速发展,栽培面积不断增加.但文心兰优质种苗的生产严重滞后,采用传统的分株方式繁殖种苗时不仅繁殖系数低 ,成本高,且种苗参差不齐,产品质量不稳定等问题普遍存在;组培繁育技术虽相对完善 ,但由于市场化品种的不断更新,种苗工厂化、标准化生产程度较低,种苗供应不足等严重影响了文心兰产业规模的提升.目前,还未见有关文心兰组培苗繁育技术的国家标准和行业标准,为了规范文心兰组培苗繁育技术,确保种苗质量,提高生产效率,在查阅相关文献的基础上,对多年来不同类型品种的组培繁育技术研究 进行了总结,提出了文心兰组培苗繁育技术规程,并应用于生产,对提高优质种苗自给率,提升文心兰产业竞争力等具重要的现实意义.
１ 组培苗繁育
１ ． １ 母 株 选 择
符合需求;植株生长健壮、无病虫害、无表型病毒特征、具有品种典型性状.切取外植体前植株提前 ７~１０d 停止浇水.
１ ． ２ 外 植 体 选 取
植株进入盛花期时,宜选用 ５~１０cm 长的幼嫩花梗,或叶片未展开的嫩芽作为外植体.
１ ． ３ 外 植 体 消 毒
幼嫩花梗取材后,在超净工作台上先用 ７５％( V / V )酒精浸湿的脱脂棉擦拭表面后置入无菌水中清洗 １~２ 次,取出后剥除幼嫩花梗的苞片,然后置入 ０．１％ HgCl ２ 水溶液中振荡消毒 ６~１０min ,取出用无菌水冲洗 ４~５ 次,最后用无菌吸水纸吸干表面水分备用;嫩芽取材后,先用手术刀剥除外部较大的鞘叶,自来水冲洗 ３０~６０min ,接着在超净工作台上用 ７５％ 的酒精振荡浸泡 ２０~３０s ,用无菌水冲洗 １~２ 次后,置入加了 １~２ 滴吐温 －８０ 的 ０．１％HgCl ２ 水溶液中振荡消毒 ６~１０min ,无菌水冲洗 ３~４ 次,用手术刀再次剥除剩余的鞘叶后,再次置入加了 １~２ 滴吐温 －８０ 的 ０．１％ HgCl ２ 水溶液中振荡消毒 ３~５min ,无菌水冲洗 ４~５ 次后,用无菌吸水纸吸干表面水分后备用.
１ ． ４ 诱 导 培 养
在超净工作台上,将已消毒的外植体置于接种盘上,用镊子和接种刀将幼嫩花梗切割成带 １~２ 个节的花梗切段;或包括生长点在内的 ０．３~０． ５cm长的嫩芽茎尖顶端组织,平放接种于事先准备好的诱导培养基中 １ / ２MS＋６ＧBA ( ２．０~４．０ )mg/ L＋NAA ( ０． ２~０． ４ )mg/ L＋ 蔗糖 ２５g / L＋ 琼脂(６． ５~７． ０ ) g / L ,pH值 ５．６~５． ８ .培养温度 ２２~２６ ℃ ,光照强度 ５００~１０００lx ,光照时间 １０~１２h / d .
１ ． ５ 增 殖 培 养
诱导培养 ５０~６０d 后,成活外植体可诱导出单芽、丛芽或类原球茎,将诱导出的材料从外植体上切割下来进行继代增殖培养.单芽或丛芽进行丛芽增殖培养,类原球茎进行类原球茎增殖培养.
切除单芽或丛芽基部无分生能力的组织及已展开的叶片后,竖向接种在增殖培养基中 １ / ２MS＋ 花宝 １ 号 １．５g/ L＋６ＧBA (２． ０~４． ０ )mg/ L＋ 椰汁 １００ml/ L＋ 蔗糖(２５~３０ ) g / L＋ 琼脂( ６． ５~７．０ ) g / L ,pH值 ５．６~５． ８ 进行丛生芽增殖培养;选取健壮的类原球茎接种在增殖培养基中:１ / ２MS＋ 花宝 １ 号１． ５g / L＋６ＧBA ( ２． ０~４． ０ )mg/ L＋NAA (０． ２~０． ４ )mg/ L＋ 椰汁 １５０ml / L＋ 蔗糖(２５~３０ ) g / L＋ 琼脂(６． ５~７． ０ ) g / L ,pH值 ５．６~５． ８ 进行增殖培养.培养温度 ２２~２６℃ ,光照强度 １５００~２０００lx ,光照时间 １２~１４h / d . ４０~５０d 继代 １ 次,丛芽继代次数不宜超过 １２ 次,类原球茎不宜超过 １０ 次.随着继代增殖次数的增加,可根据长势将 ６ＧBA 浓度降低至１． ０~３． ０mg / L , NAA 浓度降低至 ０． １~０． ３mg / L .
１ ． ６ 分 化 培 养
选取健壮的类原球茎接种在分化培养基中:１ / ２MS＋ 花宝 １ 号 １． ０g / L＋６ＧBA ( ０． ５~１． ０ )mg/ L＋ 蔗糖( ２５~３０ ) g / L＋ 琼脂 ７． ０g / L ,pH值 ５．６~５.８ .培养温度 ２２~２６ ℃ ,光照强度 １５００~２０００lx ,光照时间 １４~１６h / d .分化培养 ５０~６０d 后类原球茎陆续发育成芽苗,分化不完全的类原球茎可再次进行分化培养.
１ ． ７ 生 根 培 养
将叶片展开的丛芽苗或类原球茎分化出的芽苗(株高 ≥３．０cm )切割成单苗,按植株大小、壮弱分级后,接种于生根培养基中 １ / ２MS＋ 花宝 １ 号 １．０g/ L＋NAA ( ０．１~０．３ )mg/ L＋ 香蕉泥 ５０g / L＋ 蔗糖(２０~２５ ) g / L＋ 活性炭 １． ０g / L＋ 琼脂 ７． ０g / L ,pH值 ５．６~５． ８ .培养温度为 ２２~２６℃ ,光照强度 ２０００~２５００lx ,光照时间 １４~１６h / d .根据品种株型与培养容器规格确定适宜的接种数量,培养 ４０~６０d后可获得具有根、茎、叶的完整植株.
１ ． ８ 炼 苗
当生根苗株高 ≥５．０cm 、叶片 ≥３ 片、具 ２~３条根时,可移出培养室进行炼苗.炼苗室无阳光直射,散射光光照强度 ５０００~６０００lx ,温度 ２０~２８℃ ,空气相对湿度 ６０％~８０％ ,环境清洁.将培养瓶一字排开放置于苗床或炼苗架上,炼苗 １５~２０d .
１ ． ９ 试 管 苗 质 量
品种纯正;生长健壮,叶片舒展,叶色浓绿,根系粗壮;无污染;变异率 ≤５％ .参考相关标准 ,文心兰试管苗分级及标准参见表 １ .
表 １ 文心兰试管苗分级及其标准
２ 组培苗移栽
２ ． １ 环 境 条 件
移栽大棚要求光照均匀,空气流通,水源清洁;温度 ２０~２８℃ ,空气相对湿度 ６０％~８０％ ,光照强度 ５０００~１００００lx .
２ ． ２ 洗 苗 与 消 毒
将组培苗从培养容器中小心取出,用清水将粘附在根系上的培养基清洗干净,并按植株大小进行分级,整个过程应尽可能减少对植株的机械损伤.将分级好的组培苗放置在塑料筐内,置入 ８００~１０００ 倍多菌灵或百菌清水溶液中消毒 ３~５min ,取出后放置在移栽大棚育苗床上晾 １５~２０min 后可移栽.
２ ． ３ 基 质
水苔作为移栽基质,种植前先将水苔放入清水中浸泡 ２４h ,捞出后用清水清洗 １~２ 遍后充分挤出水分,用力挤压水苔至不出水即可.
２ ． ４ 移 栽
用适量抖松的水苔包裹住组培苗的根部置入口径 ５cm 且底部带孔的白色育苗杯中,要求水苔的用量要适中,组培苗生长点的位置要露出水苔面,水苔面要低于杯沿 ０．５~１． ０cm ,移栽过程应尽可能减少对植株的机械损伤.移栽后放入专用育苗托盘中,整齐摆放在育苗床上.
２ ． ５ 栽 培 管 理
２． ５． １ 水分管理.移栽后适当控水,保持水苔湿润状态.水苔将要干透时及时浇水,一般早上浇水,浇水时要浇透,使整个水苔湿润.
２． ５． ２ 施肥管理.移栽 ２~３d 后即可喷施叶面肥,下午喷施,叶面湿润不滴水为宜,植株勿带水过夜.移栽 ３０d 内,每 ３~４d 喷施 ２０００ 倍水溶性平衡肥( N∶P∶K＝２０∶２０∶２０ )１ 次;移栽 ３０d 后每 ４~５d 喷施 １ 次,浓度提高至 １５００ 倍;移栽 ９０d 后每 ６~７d 喷施 １ 次,浓度提高至 １０００ 倍,此阶段可在杯中补施缓释肥( N∶P∶K＝１４∶１４∶１４ )１ 次,每杯约 ０．５~１． ０g .２． ５． ３ 主 要 病 虫 害 防 治. 预 防 为 主,防 治 结合 .每 １５d 喷洒 １ 次 ８００~１０００ 倍多菌灵、百菌清或甲基托布津等广谱性杀菌剂预防病害的发生,发现病株时要及时隔离;根据虫害的季节性发生,要提前预防;各种农药要交替使用.文心兰小苗主要病虫害防治参见表 ２ .
表 ２ 文心兰小苗主要病虫害防治
２ ． ６ 移 栽 苗 质 量
不同品种的组培苗移栽 １８０~２７０d 后可达移栽苗标准,要求生长健壮,叶片舒展,叶色浓绿,根系发达;变异率 ≤５％ .参考相关标准 ,文心兰移栽苗分级及标准参见表 ３ .
表 ３ 文心兰移栽苗分级及其标准
